OZ-PO-038: MUSCLE pO₂ MODIFICATION BY OZONETHERAPY.
B. Clavo (a), L. López (a), G. Suárez (a), J.L. Pérez (b), M. Lloret (a), M. Santana (a), V. Rodríguez (c), D. Macías (b), Morera (d), F. Robaina(d) and M. Günderoth (e).
(a) Pino Hospital: Radiation Oncology-Research Unit, Las Palmas, (b) Pino Hospital: Medical Physics Unit., Las Palmas, (c) La Paterna Center, Las Palmas, (d) Pino Hospital: Chronic Pain Unit, Las Palmas, Spain, (e) Helzel Medical Systems,Germany.

There are few studies about action’s mechanisms of ozonetherapy (O₃T). We analyze their effect on oxygen partial pressure in tibialis anterior muscle. 25 subjects.were studied no patients were treated for ischemic disorders in legs. Hyperbaric Ozone was applied by autohemotherapy, 3 alternating days over one week. Muscular pO₂ (in mmHg) was measured by polarographic probes, four times. There results are: 1) 150 - 200 determinations every time Pooled data of pO₂ (Kruskal-Wallis test): significant increase of muscle pO₂: p< 0.001. 2) Correlation between individual "Increase Factor of pO₂" and "initial median pO2 value" was inverse and significant (Spearman’s rho = - 0.796, p < 0.001. 3) Inverse Correlation between "Age" and "Increase Factor pos3" (rho = - 0.541, p = 0.005). 4) Linear Regression study showed dependence of "Increase Factor pos3" with the "inverse of initial pO2 value": adjusted R² = 0.567, p < 0.001. There was a marginal dependence with "Age": p = 0.075. Ozonetherapy increases pO₂ in most ischemic muscles and therefore might be useful to improve oxygenation in ischemic tissues.

OZ-PO-039: TUMOR pO₂ MODIFICATION BY OZONETHERAPY.
B. Clavo (a), M. Lloret (a), L. López (a), G. Suárez (a), M. Santana (a), J.L. Pérez (b), V. Rodríguez (c), D. Macías (b), M.A. Hernández (a), R. Martín-Oliva (b), G. Rovira (d) and M Günderoth (e).
(a) Pino Hospital: Radiation Oncology-Research Unit, Las Palmas, (b) Pino Hospital: Medical Physics Unit., Las Palmas, (c) La Paterna Center, Las Palmas, (d) Quiron Clinic, Barcelona, Spain, (e) Helzel Medical Systems,Germany.

Hypoxic tumor cells are 2.5 - 3 times more resistant to radiotherapy, with higher metastatic potential than normoxic cells. Tumor hypoxia is an independent prognostic factor in head and neck and uterine cervix tumors. As has been demonstrated by the meta-analysis of Overgaard and the multicenter clinical trials, hypoxia modification prior to or during the course of radiotherapy can increase the effectiveness of treatment and improve prognosis. Ozonetherapy (O₃T) has been used to treat ischemic disorders. This study evaluated the effect of O₃T on tumor pO₂ in humans. We study 16 patients with advanced or relapsed cancer: Male:Female 13:3, between 50 – 91 years old. O₃T was carried out by autohemotransfusion 3 alternating days over one week. Tumour pO₂ was measured by a polarographic probe system, four times. There were 150-200 determinations every time. During O₃T there was significant increase (Friedman test: p = 0.013) in tumor oxygenation and decrease of hypoxic fractions, with prolonged effect. There was inverse and significant correlation between individual "Increase Factor" and "initial pO₂ value": higher increase oxygenation in those initially worse oxygenated tumors (Spearman rho = - 0.885, p < 0.001. These findings support that ozone therapy could be a useful adjuvant in treatment of hypoxic tumors.

OZ-PO-040: OZONO SOBRE LA ACTIVACIÓN PLAQUETARIA EN PACIENTES CON ENFERMEDADES VASCULARES PERIFÉRICAS.
Arquímides L. Díaz (a), M. García (a), Carmen Piña (a) y Silvia Menéndez (b).
(a) Instituto Nacional de Angiología y Cirugía Vascular, (b) Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba.

El objetivo de este trabajo fue verificar, en pacientes con diagnóstico de insuficiencia venosa crónica, con úlceras en miembros inferiores y con isquemia arterial subaguda, a los que se les indicó ozonoterapia, la existencia o no de inhibición de la agregación plaquetaria. Participaron en el estudio 9 sujetos de ambos sexos (49 a 81 años), que negaron haber consumido en un período previo de al menos 1 mes medicamentos antiagregantes plaquetarios (aspirina, dipiridamol, policosanol, ticlopidina). A dichos pacientes se les administró diariamente, por vía rectal, 200 mL de ozono a la concentración de 50 mg/L, combinado en algunos casos con tratamiento local de ozono, mediante bolsas plásticas, para un total de 10 a 20 sesiones. Después de 12 a 14 h de ayuno se obtuvieron muestras de sangre que fueron recogidas en tubos plásticos que contenían citrato de sodio y centrifugada a 1 500 rpm durante 5 min para obtener el plasma rico en plaquetas (PRP). El remanente fue centrifugado a 3 500 rpm para obtener el plasma pobre en plaquetas (PPP). La agregación plaquetaria en PRP fue inducida por la adición de concentraciones crecientes de epinefrina en el medio de incubación. La agregación plaquetaria encontrada al inicio del tratamiento con ozono tuvo una media de 38,19 % y un intervalo de 66,25 a 12,5 %; mientras que al final del tratamiento disminuyó hasta una media de 14,37 % y un intervalo de 28,75 a 6,25 %. El por ciento de agregación plaquetaria disminuyó en el estudio final, denotando la presencia de una inhibición de la agregación plaquetaria después de la ozonoterapia, por un mecanismo bioquímico aún no identificado, aunque se ha sugerido una inhibición por parte del ozono, de la transducción de la señal de agregación plaquetaria.

OZ-PO-041: OZONO EN EL TRATAMIENTO DE LAS MICROVÁRICES.
Rolando Wong, Alejandro Noriega y Valdés Fauly.
Centro de Investigaciones Medico Quirúrgicas, Cuba.

La insuficiencia venosa constituye uno de los problemas más frecuentes que motiva la consulta de terapeutas, angiólogos y médicos generales, siendo la conducta médica más aceptada el tratamiento esclerosante para las microvárices. En cuanto a la terapéutica de las diferentes formas de várices superficiales con o sin insuficiencia venosa crónica puede ser motivo de controversia si las várices deben ser tratadas con cirugía o método esclerosante en cada caso aislado, por lo cual es de mucha importancia la experiencia previa del facultativo a la hora de decidir la conducta. Cada día el avance técnico y la incorporación de nuevos conocimientos hacen ganar espacio a la indicación esclerosante para las várices y dejando la terapéutica quirúrgica clásica para las del tronco de la vena safena magna. Las microvárices puede ser causa de diferentes síntomas que resultan molestos para los pacientes porque muchas veces pueden o no estar en relación con incompetencia de venas superficiales o venas perforantes, en tales casos forman arañas vasculares y la conducta terapéutica obedece a problemas estéticos. Presentamos en este estudio un total de 72 pacientes con el diagnóstico de microvárices a los cuales se le realizó tratamiento con el gas ozono inyectado directamente en las microvárices mediante sesiones de tres veces por semanas. Todos fueron evolucionados y controlados por espacio de un año a través de la consulta externa donde se registró la evolución sintomatológica y estado vascular de cada paciente. Se demostró que la ozonoterapia es útil para eliminar las microvárices sin presentar complicaciones.

OZ-PO-042: OZONOTERAPIA INTRATONSILAR EN LAS AMIGDALITIS CRÓNICAS. MECANISMOS DE SEGURIDAD.
Lázaro Silva (a) y Frank Hernández (b).
(a) Centro de Investigaciones Médico Quirúrgicas, (b) Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba.

Este trabajo tiene como objetivo mostrar la evolución de 1 000 pacientes tratados con ozonoterapia intratonsilar con diagnóstico de amigdalitis crónicas, las pacientes han sido seguido hasta un año posterior al tratamiento, realizándoles controles microbilógicos (exudado faringeo y TASO), así como exámenes físicos de la región orofaringea. Otro objetivo fue demostrar que no se ha producido estrés oxidativo en los pacientes tratados, mediante estudios en sangre y lavados bronquiales. Para lograr este objetivo se escogieron 10 pacientes a los que se les realizó diagnóstico de estrés oxidativo en sangre, antes y después del tratamiento y otro grupo de 10 pacientes que se les realizó lavado bronquial, para determinar si existía ó no estrés oxidativo. Los resultados obtenidos en ambos grupos fueron satisfactorios, así como la evolución de los pacientes, tanto desde el punto de vista del examen físico, como del aspecto microbiológico.

OZ-PO-043: MACULOPATÍAS Y OZONOTERAPIA.
Yolanda Mapolón (a), Maritza Palma (a), Yadira Betancourt (b), Magalys Rodríguez (a), Irene Arias (a) y Maritza de la Cal (a).
(a) Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria, (b) Hospital Militar Clínico Quirúrgico Docente "Dr.Octavio de la Concepción y de la Pedraja", Cuba.

Se realizó un estudio longitudinal restrospectivo en 40 pacientes con diagnóstico de maculopatía degenerativa involutiva y la coriorretinopatía central serosa; desde enero de 1998 hasta diciembre de 1999, en el Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria de Camagüey con el objetivo de demostrar la eficacia de la terapia de ozono en estas patologías. Se escogieron todos los pacientes estudiados y diagnosticados en la consulta del Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria; realizándoseles refracción, perimetría, prueba de colores y rejilla de Amsler, así como el examen del fondo de ojo. El ozono fue administrado por vía rectal a razón de 15 sesiones a una concentración de 50 mg/L, todos los pacientes se siguieron por consulta externa durante el tratamiento y trimestralmente hasta un año. Al finalizar el tratamiento se pudo observar que los pacientes tuvieron una evolución favorable, demostrándose la efectividad de esta terapéutica con su total restablecimiento al lograrse cambios favorables en la agudeza visual, el campo visual y la visión de colores.

OZ-PO-044: OZONO-MAGNETOTERAPIA COMO TERAPÉUTICA EN EL PACIENTE PORTADOR DE GLAUCOMA CRÓNICO SIMPLE. EXPERIENCIA DE 10 AÑOS DE TRABAJO.
Lourdes Ferrer (b), Daisy Santos (b), Zoila Pérez (b), Idalmis Fernández (b), Francisco Varela (b) y Silvia Menéndez (a).
(a) Centro de Investigaciones del Ozono, (b) Hospital Docente "Carlos J. Finlay", Cuba.

El glaucoma crónico simple constituye la segunda causa de ceguera e invalidez visual en el mundo. Teniendo en cuenta el mecanismo de acción del ozono y del campo magnético y la fisiopatología de la enfermedad, se realizó un estudio para evaluar el efecto terapéutico de estas técnicas. Se estudiaron 200 pacientes a los que se les aplicó ozonoterapia, campo magnético y la combinación de ambos. Se evaluó la función visual y nerviosa y la presión intraocular. Se obtuvo mejoría en la agudeza visual, entre el 69 y 72 % y del campo visual entre el 59 y 76 %. Hubo tendencia a la disminución de la presión intraocular y en la latencia de la onda p 100 de los potenciales evocados visuales. Además, se realizó otro estudio en 220 pacientes, en el estadío inicial de la enfermedad y se analizó la influencia de la acción del ozono y su combinación con el campo magnético. Se obtuvo también muy buenos resultados, destacándose la mejoría en la hidrodenomia ocular, cuando los parámetros iniciales eran subnormales, basado fundamentalmente en el aumento en la facilidad de salida del humor acuoso, y aún sin empleo de tratamiento médico hipotensor local. Esto demuestra que estos métodos terapéuticos deben aplicarse en estadío latente de la enfermedad aún cuando no estén presentes las manifestaciones clínicas.

OZ-PO-045: OZONOTERAPIA RECTAL EN LA RETINOSIS PIGMENTARIA RESPUESTA CAMPIMÉTRICA EVOLUTIVA.
Mirtha Copello (a), Frank Eguila (a), Nusdalys Menéndez (a), Dayami Trigoura (a), Ernesto Alemañy (a)y Silvia Menéndez (b).
(a) Centro Nacional de Referencia de Retinosis Pigmentaria, (b) Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba.

Se realizó un estudio prospectivo analítico longitudinal en 17 pacientes portadores de retinosis pigmentaria típica, que recibieron tratamiento de ozonoterapia rectal, a una concentración de ozono de 50 mg/L, durante 15 sesiones. Se les practicó perimetría cinética Goldman, al inicio y mensual post tratamiento, hasta culminar el año. Se encontró mejoría campimétrica (> 25 %) del área basal en el 88,23 % de los pacientes tratados, siendo esta máxima en el primer mes igual a 76,47 % y con un valor promedio de mejoría de un 42,87 % del valor basal. Aplicando métodos analíticos de estimación lineal se halló una variación total, con relación al promedio basal de 288⁰, que bajo análisis estractificados sólo resultó estadisticamente significativo (p = 0,014) en los primeros 6 meses. Hubo diferencia estadisticamente significativa en los promedios del área de campo visual, al comparar el valor basal y el promedio del primer semestre (z = 27), no así el segundo semestre (z = 1,13). El tiempo promedio de estabilización del campo visual y pérdida de la significación estadística de su variación fue de 6,83 meses. Concluimos que existe un efecto positivo temporal de la ozonoterapia sobre el campo visual limitado a los primeros 7 meses post tratamiento.

OZ-PO-046: LOCAL OZONETHERAPY FOR DELAYED SCARING IN CANCER PATIENTS.
G. Rovira (a), L. López (a), G. Suárez (b), M. Santana (b), B. Clavo (b), J.L. Pérez (b), M. Lloret (b), V. Rodríguez(c), D. Macías (b), M.A. Hernández (b), R. Martín (b) and F. Robaina (b).
(a) Quiron Clinic: Ozonetherapy Unit, Barcelona, (b) Dr. Negrin Hospital: Radiation Oncology-ResearchUnit, Medical Physics Unit, Chronic Pain Unit, Las Palmas, (c) La Paterna Medical Center, Las Palmas, Spain.

Hyperbaric chambers and local ozonetherapy (O₃T) are procedures to treat ischemic wounds and delayed scaring in not cancer patients. Wounds in irradiated areas heal slowly and, sometimes, surgical wounds can delay the beginning of the chemotherapy and or radiotherapy. We show our experience treating these wounds with O₃T. From 1990 to 1999 our hospitals have treated 28 patients with delayed scaring, 12 in previously irradiated areas. Surgery has been carried out without success in 7 occasions. Male: Female 10 : 18. Age: 55 ± 14 (21 - 94). Scars were 56 ± 48 (12 - 182) days old. Areas were 43 ± 79 (0.6 - 293) cm². Fourteen scars were in breast cancer patients. The O₃/O₂ gas mixture was generated from medical oxygen at concentration of 20 - 70 mg/mL. O₃T was carried out by local techniques (bags, catheters), 23 - 30 minutes 1 - 3 times/week. During O3T, two wounds received radiotherapy and 7 chemotherapy. Data are showed as: Mean ± standard deviation (minimum-maximum). Scars were healed in 27 ± 11 (4 - 150) days, with 7 ± 3 (2 - 22) O₃T sessions. In eleven patients programmed surgery was avoided. Local ozonetherapy is an useful treatment: to: A) accelerate healing wounds in previously irradiated areas B) avoid delays to start chemotherapy and/or radiotherapy in patients with delayed scaring after oncologic surgery.

OZ-PO-047: INHIBITION OF INTERLEUKIN-8 SYNTHESIS BY INTRAARTICULAR OXYGEN/OZONE THERAPY IN PATIENTS WITH RHEUMATOID ARTHRITIS.
Z. Fahmy
Augusta Klinik, Bad Kreuznach, Germany.

5 patients with definite rheumatoid arthritis and knee effusions under constant doses of NSARD therapy were treated with up to 6 intraarticular (i.a.) injections every 3 to 7 days. Ar oxygen/ozone matched randomized control group who received a single i.a.injection of 40 mg triamcinolone hexatonide (TC) was monitored according to the same protocol. The intraarticular granulocyte counts and IL-8 levels decreases in oxygen/ozone treated patients on day 10-13 and stayes low in those patients who could be re-evaluated after 13 weeks. Compared to the IL-8 levels, the other tested cytokine levels showed only minor changes on day 10-13. There was no need for a re-injection in the TC group during 13 weeks study phase. We conclude that intraarticular oxygen/ozone therapy results in a decrease of SF-granulocyte counts. This effect may be due to the impairment of IL-8 mediated chemotaxis by decreased IL-8 synthesis in synovial fluid mononuclear cells. Clinically, repeated intraarticular oxygen/ozone therapy results in a worse 13 week outcome than i.a.steroid treatment measured in an intention-to-treat analysis.

OZ-PO-048: OZONO EN EL TRATAMIENTO DE LA OSTEOMIELITIS CRÓNICA.
Alfredo Ceballos, Rolando Wong, Mario Pedroso y Alejandro Noriega.
Centro de Investigaciones Médico Quirúrgicas, Cuba.

La osteomielitis crónica con su cortejo sintomático de fístula secretante, piodermitis y formación de bolsas piógenas, es una afección de solución quirúrgica. No obstante, a ello, fenómenos asociados a la sepsis, la esclerosis ósea y el edema, provocan un descenso del oxígeno local que altera la respuesta tisular frente a la infección. Es entonces cuando el ozono actúa como fenómeno coadyuvante por su acción de oxigenación biológica, la estimulación de los sistemas de defensa, el incremento del oxígeno tisular y también su acción germicida local, bien como gas o haciéndole reaccionar con aceites vegetales. En base a lo anterior se aplicó la ozonoterapia, junto a los procederes quirúrgicos habituales, en 30 pacientes (Grupo A) y 10 pacientes (Grupo B), cuando los procederes habían concluido y queríamos prevenir la reactivación del proceso. El ozono fue aplicado por inyección intramuscular, por autohemoterapia mayor y por tratamiento local (en bolsas y sub-atmosféricamente), además curaciones con aceite ozonizado. En el Grupo A, el 76 % de los pacientes obtuvieron resultados entre excelentes y buenos, al suspenderse la supuración, disponerse de adecuada cobertura cutánea y crearse un espacio óseo apto para injertos u otros procederes, en 60 d de evaluación. En el grupo B se evitó la recidiva luego de 30 d de aplicación, en el 80 % de los pacientes. Nuestros resultados le dan a la ozonoterapia un alto valor en el tratamiento de la sepsis de los miembros.

OZ-PO-049: LA OZONOTERAPIA COMO TERAPIA ALTERNATIVA EN DIFERENTES ENFERMEDADES.
Alfonsa Martín. Valladolid, España.

La autohemoterapia mayor con ozono ha sido empleada en disímiles enfermedades que están relacionadas por la existencia de un estrés oxidativo, un deficiente aporte de oxígeno a los tejidos y(o) alteraciones del sistema inmunológico. En este contexto, se presentan los resultados obtenidos en un paciente de 65 años de edad con el propósito de lograr una desintoxicación medicamentosa. Como es conocido este trastorno está generalmente asociado a la existencia de un estrés oxidativo provocado por los medicamentos. Tal paciente llevaba años tratándose de una enfermedad pulmonar obstructiva crónica con una serie de medicamentos que lejos de mejorar su problema le provocaron una serie de dolencias en cadena que lo llevaron hasta la paralización con dolores en todo el cuerpo y otros síntomas asociados. También se presentan los resultados obtenidos con una paciente de 64 años de edad que comenzó a tratarse con ozonoterapia, por autohemoterpia mayor después de haber sido operada de un adenocarcinoma de mama y de colon, con el fin de prevenir las metástasis. Los procesos cancerosos están generalmente relacionados con el estrés oxidativo, la hipoxia tisular y(o) inmunodepresión, lo que justifica plenamente el uso de la ozonoterapia en esta entidad. Ambos casos fueron tratados semanalmente con una cantidad total de 3000 microgramos de la mezcla ozono/oxígeno. A partir de la 5a semana, los dos pacientes comenzaron a sentir mejorías apreciables hasta alcanzar un restablecimiento total, manteniendo actualmente actividad y vida normal. En esta mejoría se evaluó el criterio clínico junto a distintas pruebas analíticas que corroboraron los resultados. En el caso de la paciente operada de adenocarcinomas no se ha podido encontrar indicios de ninguna nueva neoformación a través de pruebas endoscópicas y de resonancia magnética nuclear. Se concluye que la ozonoterapia, como terapia alternativa o complementaria, tiene un alto valor terapéutico y preventivo de muchas de las enfermedades que acosan a la humanidad.

OZ-PO-050: THE USE OF OZONE IN COLONIC THERAPY.
Dirk Yow.
Tahoma Clinic, Kent, Washington, USA.

This paper reviews the outcome of a combination of ozone therapy with colonics administered (herbal enemas) through the methods passed on in the naturopathic tradition in the USA, in the last three years. The relationship of ozone and its oxidative properties along side an ability to enhance the colonyc hydrotherapy responses in a variety of factors related to various symptoms and ailments will be discuss. 250 patients (men and women with an age range between 15 and 85) were received into therapy in the Colon Therapy Department by self referral, after an evaluation of a health questionnaire performed by the medical director, or by referral from a physician. Of the patients treated the major indications were: gastro-intestinal complaints, cutaneous conditions, malaise and chronic fatigue, arthritic conditions and others. It is postulated that the methods of achieving benefit accrue through: 1.Drainage and treatment of infected tissues, 2. Breaking the formation of vicious cycles in auto-intoxification, 3. Building up immunity against infection, 4.Treating specific infectious organisms, 5. Defining secondary foci and primary foci. The clinical benefit ratio for this form of therapy, as an adjunct to other modalities, is favorable.

OZ-PO-051: LIPODISTROFIAS LOCALIZADAS TRATADAS CON OXÍGENO-OZONOTERAPIA.
Arabali Zolfagharian.
Córdoba, Argentina.

Se realizó un estudio multicéntrico donde 45 pacientes de sexo femenino fueron tratadas por sus trastornos de tejido adiposo "lipodistrofias localizadas". A uno de los grupos se le efectuó el tratamiento con oxigeno-ozonoterapia, durante seis semanas con una frecuencia bisemanal, ya que esta terapia por sus efectos fisiológicos ha demostrado ser eficaz en múltiples patologías de origen circulatorio actuando sobre los ácidos grasos insaturados. En el grupo control se le realizó tratamiento mesoterapéutico con cóctel a base de enzimas lipolíticas y vasoactivas. La eficacia fue valorada por biopsias de piel e imagen fotográfica. De acuerdo a la evaluación de los cambios histológicos e imagenológicos realizados en ambos grupos, se observó una notable ventaja del tratamiento con oxígeno-ozonoterapia con respecto a la mesoterapia con enzimas lipolíticas y vasoactivas.

OZ-PO-052: OZONOTERAPIA Y CAMPO ELECTROMAGNÉTICO EN EL TRATAMIENTO DE LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER.
Juan de J. Llibre, Zoila Pérez, Juan A. Samper y Tania Laucerique.
Hospital Docente "Dr. Carlos J. Finlay", Cuba.

La enfermedad de Alzheimer (EA) constituye un problema creciente a nivel mundial en el orden médico, psiquiátrico, neurológico, epidemiológico, económico y fundamentalmente humano. Los radicales libres que producen peroxidación de lípidos de membrana, disrupción de ácidos nucléicos, oxidación de proteinas, constituye uno de los factores etiopatogénicos en la EA. Teniendo en cuenta que el ozono es capaz de activar los sistemas de defensa antioxidante, así como mejorar la oxigenación de los tejidos se realizó un estudio en 45 pacientes con demencia senil de tipo Alzheimer probable. Los pacientes se dividieron al azar en tres grupos: ozonoterapia (por via rectal), magnetoterapia y tratamiento combinado. Se definieron tres tipos de respuesta: regresión o mejoría, progresión y no respuesta, de acuerdo con la escala de deterioro global edad-dependiente y de la enfermedad de Alzheimer (GDS) y el mini-examen del estado mental, así como el criterio familiar y del equipo médico en cuanto a mejoría en manifestaciones psiquiátricas y conductuales y otros parámetros que midan calidad de vida. Se obtuvo una respuesta de regresión o mejoría en el 60 % de los casos con magneto y ozonoterapia combinados, al mes de tratamiento, la cual se mantuvo en el 46,6 % de los pacientes aún a los seis meses del tratamiento, respuesta que no se obtuvo con el empleo del campo magnético o del ozono como métodos aislados. No se presentaron manifestaciones posteriores de toxicidad que obligaran a la suspensión del tratamiento.

OZ-PO-053: OZONOTERAPIA EN EL ICTUS AGUDO ISQUÉMICO.
Pablo O. Castillo, Otman Fernández, Tomasa Salas, y Onia Torres.
Instituto Nacional de Neurología y Neurocirugía, Cuba.

Se conoce que la enfermedad cerebro vascular es la tercera causa de muerte en el mundo y en nuestro país. Teniendo en cuenta las propiedades terapéuticas del ozono y sus diferentes aplicaciones médicas como en la insuficiencia vascular periférica, neuropatías ópticas, cardiopatía isquémica, etc., se realizó un estudio en 60 pacientes, con ictus agudo isquémico. A todos los pacientes se les realizó TAC de cráneo, para dilucidar la etiología del ictus, así como potenciales evocados auditivos y visuales y flujo sanguíneo cerebral, al inicio y al final del tratamiento. Se les aplicó, junto con la medicación apropiada para la patología de base, ozono rectal a las 72 h de establecido el ictus, comenzando con 150 mL del gas, las tres primeras sesiones y a partir de la cuarta con 250 mL, hasta concluir el tratamiento (15 sesiones). Se observó mejoría en la actividad motora y psíquica superior, disminución en la latencia en los potenciales evocados auditivos y visuales y aumento del flujo sanguíneo cerebral. Además, hubo un aumento en el rendimiento y mejoría en la resistencia al ejercicio, lo cual benefició grandemente la rehabilitación precoz del paciente. En general, la ozonoterapia aceleró la mejoría de los pacientes con ictus agudo isquémico.

OZ-PO-054: OZONOTERAPIA EN EL TRATAMIENTO DE LAS CEFALEAS VASCULARES.
Laritza Solier y Hermys Vega.
Centro de Investigaciones Médico Quirúrgicas, Cuba.

El tratamiento moderno de la migraña se caracteriza por la diversidad de medidas terapéuticas, con la aplicación de las cuales se han obtenido mayores o menores éxitos. Esta situación ha favorecido la continua búsqueda de soluciones terapéuticas más eficaces o complementarias de las ya existentes. Se realizó un estudio en 15 pacientes con diagnóstico de migraña de más de 5 años de evolución, sin distinción de edad, sexo y raza. Los primeros 5 pacientes recibieron ozono por vía endovenosa (autohemoterapia mayor, a una dosis de ozono de 10 mg) y los 10 restantes por vía rectal (dosis de 10 mg), en dos ciclos de 15 sesiones cada uno, con tres m entre uno y otro ciclo. Los pacientes fueron evaluados, clínicamente, al inicio y final de cada ciclo. El 80 % de los pacientes se reportaron sin crisis migrañosas después del primer ciclo y el 93,3 % después del segundo.

OZ-PO-055: OZONOTERAPIA. EXPERIENCIA COMO MÉTODO TERAPÉUTICO EN LA HEPATITIS VIRAL AGUDA.
Yadira Betancourt (a), Juan Carlos Piña (b), José Manuel Toledo (a), Arcadio Gómez (a), Yolanda Mapolón (c) y María Betancourt (a).
(a) Hospital Militar Clínico Quirúrgico Docente "Dr. Octavio de la Concepción y de la Pedraja", (b) Hospital Pediátrico Provincial de Camagüey "Dr. Eduardo Agramonte Piña", (c) Centro Provincial de Retinosis Pigmentaria, Cuba.

Se realizó un estudio analítico longitudinal de casos y controles en 80 pacientes con diagnóstico de hepatitis viral aguda, desde septiembre de 1996 hasta enero de 1999, en el Hospital Militar Clínico Quirúrgico Docente "Dr. Octavio de la Concepción y de la Pedraja" de Camagüey. Fueron escogidos todos los pacientes que oscilaban entre 15 y 49 años de edad. Para el diagnóstico de hepatitis se cumplió el criterio clínico y de laboratorio. A 40 pacientes que conformaron el grupo estudio se les aplicó el tratamiento convencional (reposo-dieta) y ozonoterapia; a los 40 pacientes restantes, que constituyeron el grupo control, sólo se les aplicó el tratamiento convencional. El ozono fue administrado diariamente, por vía rectal a una concentración de 55 mg/L, para un total de 10 sesiones. Todos los pacientes incluídos en el estudio se ingresaron en nuestro Centro para establecer igualdad de condiciones en ambos grupos. Durante la primera semana de tratamiento con ozono tuvo lugar la regresión de los síntomas. Todos los pacientes lograron la curación al final del tratamiento. Bajo la terapéutica convencional estos síntomas permanecieron por más de 10 d y la curación se prolongó hasta 4 meses y más. Con estos resultados podemos decir que la ozonoterapia junto a la terapéutica convencional es útil para el tratamiento de la hepatitis viral aguda permitiendo una rápida incorporación a la vida social y laboral.

OZ-PO-056: THE MICROCLIMATE CHAMBER: TOPICAL TREATMENT OF LONG-ENDURING LEG ULCERS WITH OZONE.
Noam A. Calderon and Teddy Kaufman.
Division of Plastic Surgery, Bnai-Zion University Medical Center, Haifa, Israel.

Chronic leg ulcers associated with a risk of amputation imply challenges to the medical team. The aim of this study is to assess the topical effects of ozone and oxygen on the healing process of long-enduring ulcers of the lower leg, which previously have not responded to conventional modalities of treatment. 63 patients were included, who sustained leg ulcers for a mean duration of 8.5 months, suffering of diabetes mellitus; venous or arterial insufficiency or, a combination of them. Eleven patients were previously candidates for amputation of the limb in another institution. Local treatment consisted of conventional topical wound care with adjuvant treatment with ozone and oxygen delivered topically unto the wounds 3 times/week – employing a newly designed microclimate chamber. Healing was assessed by serial digital photography and a computerized plannimetry, while bacteriology – by serial quantitative bacterial counts of the affected wounds. No side effects were observed. The mean number of treatments was 28.5/patient. In 49 patients (including 11 who were previously candidates for amputation) spontaneous healing was noted or, skin grafting was employed to the well-granulated wounds. Pseudomonas aeroginosa and Staphiloccoccus aureus were eradicated within 24 and 48 hours, respectively. Although in 14 patients no amelioration was observed, due to delayed dislough of the eschar, the bacteriostatic effects of ozone on wound’s flora was significant. In view of the beneficial effects of ozone, we recommend to further extend the study on a larger scale of patients, and to compare its effects on a controlled group of patients.

OZ-PO-057: CARACTERIZACIÓN Y COMPARACIÓN DE TRES SISTEMAS DE ACEITE DE COCO OZONIZADO.
Maritza Díaz, Daily Castañeda, Wilfredo Díaz, Nayibi Núñez y Frank Hernández.
Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba.

El aceite de coco está compuesto por un 97% de triglicéridos los cuales están formados por ácidos grasos saturados e insaturados los que influyen en sus características físicas y químicas. La reacción del ozono con los ácidos grasos insaturados del aceite de coco genera la formación de fragmentos con grupos carbonílicos, carboxílicos y peroxídicos, los cuales pueden estar relacionados con su actividad biológica. En el presente estudio se caracterizan y se comparan estadísticamente los tres sistemas (aceite de coco, aceite de coco con agua y aceite de coco con etanol), para ello se utilizaron técnicas de análisis volmétricas en la determinación de índice de peróxidos, de acidez, así como una técnica analítica para la medición de viscosidad. Además, se identificaron por RMN¹H los productos de reacción y se evaluó la actividad antimicrobiana de los tres sistemas estudiados. El aceite de coco ozonizado con etanol alcanzó mayores índices de peróxidos y acidez al ser comparado con los otros sistemas. Este resultado sugiere que ocurre una mayor descomposición de los peróxidos lo que conlleva a una mayor formación de ácidos. Los coefficientes de variación en ambos índices fueron menores del 10% lo que demuestra una alta precisión en las determinaciones. Se identificaron mediante RMN¹H los productos de reacción los cuales fueron ozónidos, hidroperóxidos y aldehídos. Se evaluó la actividad antimicrobiana en los tres productos testados teniendo mayor espectro de acción el aceite de coco ozonizado con etanol.

OZ-PO-058: DETERMINATION OF OLEOZON^® POLAR COMPOUNDS BY LIQUID - LIQUID EXTRACTION AND GAS CHROMATOGRAPHY.
Oscar Ledea (a), Mayhery Escobar (a), Arístides Rosado (b), Teresa Correa (b), Daniel Jardines (a) and Jesús Moleiro (a).
(a)Ozone Research Center, (b) National Center for Scientific Research, Cuba.

The components of the polar fraction of OLEOZON^® were identified and quantified by a combination of a liquid-liquid extraction method with Gas Chromatographic (GC) and Gas Chromatographic-Mass Spectrometry Techniques (GC-MS). Saturated and unsaturated aldehydes and carboxylic acids were the main products found. Hexanal, nonanal and 3-nonenal were the main components of the polar fraction of OLEOZON^®. The aldehyde concentration was an order higher than the respective carboxylic acid. Good linearity was proven within the concentration range from 0,01 to 0,1 mol/L for aldehydes and from 0,001 to 0,01 mol/L for carboxylic acids, according to the values of the correlation coefficient (> 0.999). The values of recovery obtained in the accuracy assay were higher than 90 % for all the aldehydes and carboxylic acids assayed. The variation coefficients from the repeatability study were lower than 2 % for all the studied compounds. The detection limit for both kind of compounds was in the same order (10-6 mol/L) and some orders lower than the concentration of the aldehydes and carboxylic acids in the real sample (10-3 -10-1 mol/L). The analytical method employed was lineal, accurate, precise and sensible under the studied conditions and allowed the identification of the different compounds present in the polar fraction of OLEOZON^®.

OZ-PO-059: EN ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL DE OLEOZON^® ESPECIES GRAMPOSITIVAS. CEPAS DE COLECCIÓN Y AISLAMIENTOS CLÍNICOS MULTIRRESISTENTES.
Irene Lezcano (a), Nayibi Núñez (a), Magaly Gómez (a), María Espino (b) y Odelsa Ancheta (c).
(a)Centro de Investigaciones del Ozono, (b) Hospital "América Arias", (c) Centro Nacional de Investigaciones Científicas, Cuba.

El aceite de girasol ozonizado, OLEOZON^®, ha mostrado ser un agente antimicrobiano eficaz frente a diversas especies bacterianas. El objetivo de este trabajo fue estudiar la actividad in vitro del OLEOZON^® sobre especies grampositivas, tanto cepas de colección, como cultivos multirresistentes. Se determinaron las Concentraciones Mínimas Inhibitorias y Bactericidas (CMI y CMB). Además, se realizaron estudios simultáneos de cinética de mortalidad y microscopia electrónica. Los resultados indicaron que el OLEOZON^® es efectivo frente a todas las cepas en estudio. Las CMI estuvieron entre 1,18 y 9,5 mg/mL, mientras las CMB se encontraron en el intervalo de 46,8 a 570 mg/mL. El proceso de mortalidad mostró un primer orden cinético con respecto a la concentración bacteriana. El tiempo necesario para obtener la letalidad de las especies estudiadas estuvo en el intervalo de 60 min a 4 h. Los estudios de microscopia electrónica mostraron mayores daños en el citoplasma celular.

OZ-PO-060: IN VITRO AND IN VIVO EFFECTS OF ORAL OLEOZON^® ON GIARDIA LAMBLIA TROPHOZOITES.
Damián Hernández (a), Frank Hernández (b), Zullyt Zamora (b), Maritza González (b), Odelsa Ancheta (c), Dinorah Torres (d) y Marta Bouza (d).
(a) Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas "Victoria de Girón", (b) Centro de Investigaciones del Ozono, (c) Centro Nacional de Investigaciones Científicas, (d) Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kouri", Cuba.

In the present paper in vitro and in vivo studies were carried out. Firstly, the in vitro inactivation capacity of OLEOZON^® on Giardia lamblia trophozoite cultures was evaluated. Mean and maximum inactivation doses under controlled conditions were determined, and the effect of OLEOZON^® on the Giardia lamblia ultrastructure was evaluated by electron microscopy. In the second part of this work, Giardia lamblia trophozoites inactivation was evaluated in inoculated gerbils treated with OLEOZON^®. The effect of the treatment on several biochemical parameters in blood (glutathione peroxidase, catalase, glutathione S-transferase, reduced gluthatione, superoxide dismuthase, conjugated dienes, uric acid, reactive substances to thiobartituric acid and glucose 6-phosphate dehydrogenase) was measured. Results show that, depending on dose and microorganism concentration, OLEOZON^® inactivates Giardia lamblia trophozoites by damaging the cell structure provoking the death of parasites. No significative change was observed in biochemical parameters. Under the experimental conditions of this study, OLEOZON^® showed to be highly effective in inactivation and disinfecting of Giardia lamblia trophozoites and its effectiveness in this experimental model was similar to the obtained by metronidazol

OZ-P-061: OZONE INACTIVATION KINETIC OF ANTIBIOTIC MULTIRESISTANT STRAINS OF BACTERIA.
Mirza Gutiérrez, I. Lezcano, E. Sánchez and C. Baluja.
Ozone Research Center, Cuba.

One of the more important problems in antibiotic therapy is the capability of bacteria to developed antibiotic multiresistance. The man contact with these microorganisms can be by different way (exp. Infection water, direct contact etc.). The oxidant property of ozone is used in water treatment. The objective of this work is determine the ozone inactivation kinetic of different grampositive and gramnegative bacterial strains from clinical isolation that resist more concentration of chloride and to compare them with reference strains. The final concentrations of microorganisms employed in experiments were from 10⁵ to 10⁷ CFU/mL, and the chloride resistant concentration was between 0,5-4,0 mg/L in water. The ozone concentrations in water were between 0,36-2,0 mg/L. The result suggest that antibiotic multiresistant strains resist more concentration of chloride than the reference strains, and the grampositive are more resistant than gramnegative strains. The ozone inactivation follow a first order kinetic law with respect to the bacterial concentration, and a second kinetic order for ozone concentration. The general resistant order to ozone is: antibiotic multiresistant more resistant than reference strains and grampositive more resistant than gramnegative strains. There are statistics difference in ozone resistant inside of strains of Escherichia coli and positive coagulases Staphylococcus species.

OZ-P-062: ESTUDIO DEL EFECTO MUTAGÉNICO DEL OZONO ADMINISTRADO POR INSUFLACIÓN RECTAL EN ROEDORES.
Antonia C. Remigio (a), Gladys Pérez (a), Nidia Fernández (a), Yesenia Rivero (a), Maria E. Arteaga (a), Zullyt Zamora (b), Yousy González (b) y Jesús Moleiro (b).
(a) Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio, (b) Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba.

La reaccion del ozono con los lípidos ocurre exclusivamente a nivel de los dobles enlaces carbono-carbono presentes en los ácidos grasos poliinsaturados, generándose peróxidos organicos y ozonidos, que en cantidades adecuadas y controladas ejercen diferentes acciones biológicas, las cuales le confieren al ozono un conjunto de propiedades terapéuticas. En este trabajo se estudia el posible efecto mutagénico del ozono aplicado por vía rectal. Se empleó el análisis de médula ósea en ratones NMRI mediante el ensayo de micronúcleos y en ratas SPRD mediante el ensayo de aberraciones cromosómicas. Fueron utilizadas dos concentraciones de ozono (50 y 75 m g/mL). Como controles negativo y positivo se utilizaron oxígeno y ciclofosfamida (40 mg/kg) respectivamente. Se realizaron 10 administraciones cada 24 horas. Al final del tratamiento los animales fueron sacrificados y procesada la médula ósea para obtener las preparaciones. Los resultados demuestran la no evidencia de efectos citotóxicos, ni clastogénicos (inductor de aberraciones cromosómicas) sobre la médula ósea de los roedores tratados.

OZ-P-063: EFECTO GENOTÓXICO DEL OZONO EN LEUCOCITOS DE SANGRE PERIFÉRICA HUMANA.
Silvia Díaz (a), Yanela González (a,b), E. Prieto (b) y Angel Azoy (a).
(a) Centro de Investigaciones y Evaluaciones Biológicas, Instituto de Farmacia y Alimentos, (b) Centro de Investigaciones Biomédicas "Victoria de Girón", Cuba.

El efecto genotóxico del ozono fue estudiado en leucocitos humanos in vitro usando el ensayo de electroforesis alcalina de células individuales (EACI). El tratamiento de las células, que se realizó durante 1 h a 37°C con 0,9-5,3 mmol/L de O3, condujo a un incremento del daño al ADN dependiente de la dosis, comparable al inducido por 4-40 mmol/L de H2O2, usado como control positivo. Este efecto del ozono fue revertido por la incubación post-tratamiento de las células durante 45-90 min a 37°C, y prevenido por la preincubación de las células con catalasa (20 µg/mL). Estos resultados demuestran que el O₃ induce daño al ADN en leucocitos humanos de sangre periférica. Este daño es rápidamente reparado y probablemente mediado por la formación de H₂₂.

OZ-P-064: DAÑO AL ADN EN LEUCOCITOS DE SANGRE PERIFÉRICA Y EN CÉLULAS EXFOLIADAS DE LA MUCOSA DEL COLON Y RECTO DE RATAS TRATADAS CON OZONO.
Silvia Díaz (a), Yanela González (a,b) y Jorge González (a).
(a) Centro de Investigaciones y Evaluaciones Biológicas, Instituto de Farmacia y Alimentos, (b) Centro de Investigaciones Biomédicas "Victoria de Girón", Cuba.

La terapia con ozono (O₃) ha adquirido relevancia debido a su eficacia en diversas enfermedades asociadas al déficit en las defensas antioxidantes. Sin embargo, este gas tiene demostrados efectos tóxicos por inhalación y han sido reportados estudios que evidencian su efecto mutagénico en microorganismos y genotóxico en animales y células humanas in vitro. La insuflación colorectal es una de las vías que más se utiliza en la aplicación de la terapia y por la cual las células de la mucosa se encuentran directamente expuestas al agente. Para estudiar el efecto del tratamiento sobre las células colorectales, así como el efecto en leucocitos de sangre periférica se utilizó la rata como modelo experimental, el cual ha sido usado con éxito en otros ensayos con O₃. Las ratas fueron tratadas durante 4 d con 42 m g/mL por peso corporal. Se usó además un control no tratado (NT) y un control positivo con bleomicina (BLM). Los muestreos se realizaron después de los diferentes tratamientos con el gas. Se produjo daño al ADN tanto en células exfoliadas como en leucocitos y se observó un incremento gradual de las longitudes de migración y del porcentaje de células dañadas en función del tiempo de muestreo. Las muestras después de las 48 h de tratamiento indican una tendencia hacia la recuperación del daño o eliminación de las células dañadas no viables. Mediante este estudio se comprueba que el O₃ genera daño tanto en las células directamente expuestas, como en leucocitos. En este último caso probablemente debido a la acción de sus intermediarios reactivos.

OZ-P-065: IS INHALETED OZONE CARCINOGEN?
Siegfried Schulz.
Veterinary Services, Philipp-University of Marburg/L, Germany.

Ozone as a major constituent of photochemical smog has been suspected as a risk factor for the development of lung cancer. The inhalation of ozone is strongly excluded in the strategies for therapeutic use of medical ozone, but ozone inhalation can not always be prevented in outdoor (atmosphere) and indoor (ozone user and patients) situations. Whether ozone has carcinogen potential has been repeatedly examined in isolated cell systems or in experimental animals. Mice seem to be the most sensitive indicators for lung tumor carcinogenesis in comparison to rats. With a new design of inhaled ozone (ultra short x high ppm) we compared our results, from NMRI-mice, with that calculated dosages of other authors and discussed the steps of carcingenesis (inhibition-promotion-progression). Ozone is not a primary lung carcinogen compared to urethan (neumotropic carcinogen). Ozone enhances the promotion of otherwise initiated lung tumors (pro-carcinogenesis) and also inhibits the promotion (anticarcinogenesis) probably by direct cytotoxic effects. Inhaled ozone has a mitogenic activity on lung cells (pneumocytes Typ II cell hyperplasia) and by thus it enhances the risk for initiation of lung tumors (adenonas) caused by carcinogenic neumotropic chemicals. There was no evidence for ozone carcinogenesis in NMRI-mice without a carcinogenic drug.

OZ-P-066: MODIFICACIÓN DE ERITROCITOS POR OZONO: EFECTO DEL TROLOX.
M.E. Hidalgo (a) y L.E. Lissi G. (b).
(a) Instituto de Ciencias Biológicas y Químicas, Universidad de Valparaíso (b) Facultad de Química y Biología, Universidad de Santiago de Chile, Chile.

En la búsqueda de más información acerca del mecanismo de daño del ozono sobre los eritrocitos humanos, hemos investigado la acción antioxidante del trolox (ácido 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametil croman-2-carboxílico) midiendo la oxidación de la hemoglobina (metahemoglobina, hemicromo), fragilidad osmótica, actividad de la superóxido dismutasa y catalasa, hemólisis y sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS), tanto en hemolizados como en eritrocitos intactos. Las muestras de sangre se obtuvieron de voluntarios sanos (edades comprendidas entre 19 y 25 años). El ozono fue generado haciendo pasar oxígeno puro gaseoso por una lámpara ultravioleta a una velocidad de flujo de 50 mL/min. Durante la exposición a ozono se observó el efecto protector del trolox: disminuyó la producción de TBARS, el consumo de hemoglobina no oxidada disminuye, así como la producción de metahemoglobina y hemicromo, tanto en suspensiones como en hemolizados. La actividad enzimática se mantiene en presencia del antioxidante. Anteriormente se probó la acción de la tiourea, para evaluar la presencia de radicales hidroxilo, comprobándose un efecto protector tanto en hemolizados como en suspensiones. Las características de solubilidad del trolox le impiden atrapar radicales lipofílicos dentro de la membrana. Por tanto su efecto protector corrobora que el daño por ozono se manifiesta principalmente en el exterior de la membrana, sin penetración al interior del eritrocito y que en este daño participan radicales hidroxilo.

OZ-P-067: LA ADMINISTRACIÓN RECTAL DE OZONO SOBRE LA INFLAMACIÓN ASÉPTICA INTRAPERITONEAL.
María O. Fox (a), Sarai del Río (a), Silvia Menéndez (b), Ernesto Barber (a), Zullyt Zamora (b), Siegfried Schulz (c) y Maritza Victorio (a).
(a) Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas "Victoria de Girón", (b) Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba; (c) Universidad de Marburg, Alemania.

Se empleó el modelo de inflamación aséptica intraperitoneal con el propósito de estudiar los efectos que la ozonoterapia podría ejercer sobre la actividad fagocítica. Se tomaron 36 ratas Wistar hembras de 250 ± 18 g de peso corporal y se dividieron en dos grupos de estudio: experimental (E), 18 ratas tratadas con ozono rectal durante 5 d a una dosis diaria de 24 mg/kg de peso corporal y control (C), 18 ratas tratadas con oxígeno rectal durante 5 d. Al final del tratamiento, a todas las ratas les fueron implantadas, en condiciones asépticas, intraperitonealmente, dos láminas cubre objetos y luego cerrada la cavidad. Dichas láminas fueron extraídas a las 24 h (subgrupos C1 y E1), a los 3 (subgrupos C3 y E3) y a los 4 d (subgrupos C4 y E4), conteniendo cada subgrupo 6 animales. Dos horas antes de la extracción de las láminas se les inoculó 0,5 mL de hematíes de gallo lavados en suero fisiológico, que permitieron valorar la actividad fagocítica de las células mononucleares de la inflamación presentes en las láminas. A las ratas se les anestesió con la mezcla xilaxin/ketamina, previo a la extracción de las láminas. Las células adosadas a dichas láminas fueron fijadas y colocadas con reactivo May Grümwald-Giensa y montadas en su correspondiente portaobjeto. Las lecturas se realizaron con un microscopio de luz en campos sucesivos hasta alcanzar las 100 células mononucleares. Además se midió el Factor de Necrosis Tumoral (TNF) en los subgrupos E1, E3, E4 y en un grupo control donde sólo se le aplicó el anestésico, puesto que es conocido que los narcóticos pueden tener alguna influencia sobre el TNF. Se obtuvo un aumento significativo (p < 0,005) en el índice fagocítico en los subgrupos E1, E3 y E4 con respecto a los subgrupos C1, C3 y C4, así como también en el número de células que habían fagocitado. Con respecto al TNF no se observó aumento del mismo en ninguno de los grupos pretratados con ozono ni en el grupo con anestésico solo.

OZ-P-068: OPTIMIZACIÓN DEL TRATAMIENTO DE OZONOTERAPIA EN EL PROCESO DE ISQUEMIA-REPERFUSIÓN RENAL.
Jose L. Calunga (a), E Barber (b), Silvia Menéndez (a), Nelson Merino (c) y Eduardo Cruz (b).
(a) Centro de Investigaciones del Ozono, (b) Instituto de Ciencias Básicas Preclínicas "Victoria de Girón", (c) Centro de Investigaciones y Evaluaciones Biológicas del Instituto de Farmacia y Alimentos, Cuba.

No se conocen métodos para predecir cual órgano funcionará mejor después de haberse sometido a isquemia caliente y fría seguida de reperfusión. Fue nuestro propósito en este trabajo valorar el efecto del ozono sobre los riñones de ratas sometidos a isquemia caliente, así como comparar la función de los riñones tratados previamente con ozono con respecto al resto de los grupos de estudio. Otro objetivo lo constituyeron valorar el efecto del ozono sobre indicadores directos e indirectos del estrés oxidativo y determinar el período óptimo de tratamiento con ozono. En nuestro trabajo se tomaron 80 ratas Wistar, de 250 g de peso, del sexo femenino, agrupadas en 8 conjuntos de 10 animales cada uno a los cuales se le provocó isquemia renal durante 30 min, seguida de 3 h de reperfusión y midiéndosele el flujo plasmático renal y la intensidad de la filtración glomerular como variables funcionales y como variables bioquímicas se deterninó por técnicas espectrofotométricas la superóxido dismutasa (SOD), la fosfolipasa A2 y la fructosamina. Se realizaron además estudios morfológicos para determinar las alteraciones estructurales que aparecían durante el experimento. Los grupos de trabajo estuvieron distribuídos de la siguiente forma: grupo control sano (I), grupo control isquémico (II), grupo control oxígeno a los 5 d (III), grupo control oxígeno a los 10 d (IV), grupo control oxígeno a los 15 d (V), grupo ozono a los 5 d (VI), grupo ozono a los 10 d (VII), grupo ozono a los 15 d (VIII). Los resultados mostraron una marcada disminución del flujo plasmático renal y la intensidad de filtración glomerular en todos los grupos (control isquémico, control oxígeno de 5, 10 y 15 d de tratamiento, a excepción del grupo tratado con ozono previamente el cual, mantuvo valores estadísticamente similares a los controles sanos. Las variables bioquímicas arrojaron resultados equivalentes. Las lesiones estructurales fueron significativamente menor en el grupo tratado con ozono específicamente a los 15 d en relación con los controles isquémicos y de oxígeno. Se interpretan los resultados dependientes de la acción de mejorar las propiedades reológicas de la circulación reconocidas al ozono y el efecto "precondicionante" del mismo protegiendo al órgano de estrés oxidativo.

OZ-P-069: EVOLUCIÓN DEL DAÑO MULTIORGÁNICO, EN UN MODELO EXPERIMENTAL DE RATÓN QUEMADO, TRATADO CON ALOE B, OZONO Y FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDÉRMICO.
Teresita Montero (a), Silvia Menéndez (b) y José Hurtado (a).
(a) Hospital Clínico Quirúrgico "Dr. Luis Díaz Soto", (b)Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba.

La enfermedad por quemaduras es un conocido tema de interés médico por cuanto nos permite líneas de investigaciones relacionadas con la sepsis, el síndrome de inflamación sistémica generalizada, el síndrome de disfunción múltiple de órganos, el shock y el trauma entre otros. El objetivo de este trabajo fue evaluar la evolución del daño multiorgánico en un modelo experimental de ratón quemado crítico con la utilización de Aloe B, ozono (O₃) y factor de crecimiento epidérmico (EGF). Se utilizó un modelo de quemadura seca, en 96 ratones hembras Balb/c, divididas en 4 grupos: suero fisiológico como control (SF), Aloe, O3 y EGF, de 20 ± 2 g, 12 semanas, con depilación combinada, anestesiados con ketamina ip (150 mg/kg), 5 min antes de la quemadura. La quemadura se produjo con un equipo de soldadura automática, con 2 placas de bronce adaptadas, con un área de 6 cm² cada una, en la región dorsal inferior paravertebral del animal, a una temperatura de 100 ºC. Los animales se reanimaron con 1 mL de SF ip y tratados inmediatamente, después de la quemadura, con 15 tratamientos de Aloe B inyectable (0,3 mg/20 g en la primera semana y 0,2 mg/20 g en la segunda semana, llevados hasta 1 mL). Se utilizaron 0,9 mL de ozono a una concentración de 37 mg/L, durante 15 tratamientos, por via rectal. El EGF (500 m g en 1 mL) ip, en dosis única. El grupo SF, 1 mL ip. En los grupos SF, Aloe, O₃ y EGF fallecieron 12, 13, 9 y 4 animales, respectivamente. Respecto a la vitalidad, en el grupo SF se encontraron 16 animales moribundos y 3 con poca vitalidad. En el grupo Aloe, 5 moribundos y 14 poco activos, aunque con signos vitales. En los grupos EGF y O₃ se encontraron 20 y 15 animales activos y 4 y 7 moribundos, respectivamente. En el estudio histológico, los grupos EGF y O3 presentaban mayor actividad del tejido linfoide en el bazo y menor daño hepático y renal, mientras que el grupo control presentó mayor manifestación de daño multiorgánico.

OZ-P-070: ESTUDIO MORFOFUNCIONAL RENAL EN RATAS USANDO EL OZONO COMO CONTRASTE PARA ARTERIOGRAFÍAS.
Sarahi del Rio (a), Jorge Alfonso (b), Ernesto Barber (a), Silvia Menéndez (c ) y Lucía González (a).
(a) Instituto Superior de Ciencias Básicas "Victoria de Giron", (b) Instituto de Nefrología "Dr. Abelardo Buch López", (c) Centro de Investigaciones del Ozono, Cuba.

La posibilidad del uso del ozono como medio de contraste alternativo para arterografia determinó la realización del presente trabajo con el fin de evaluar la posible repercusión de dicho gas, administrado por vía arterial sobre el riñón. A tal fin se utilizó una muestra de 10 ratas, con peso corporal de 402 ± 0,25 g, anestesiadas con uretano a una dosis de 1 mL / 100 g. Posteriormernte se canuló con un cateter de polietileno de 0,7 mm la arteria ileaca derecha hasta un 1 cm por encima de las arterias renales y se les administró lentamente por esta vía ozono, a una dosis de 1 mL/kg con una concentración de 33 mg/L. Pasados 10 min se administró por la vena femoral izquierda dos bolos de paraminohipurico (pAH) e inulina, 0,1 mg y 2 mg, respectivamente, para estudiar flujo plasmático renal (FPR) e intensidad de filtración gromerular (IFG), por la técnica multicompartimental sin muestras de orina, tomándose 9 muestras de 200 m L de sangre arterial cada 10 min. Al final los animales fueron sacrificados por punción cardiaca tomando 2 mL de sangre para determinación de creatinina y extraidos los riñones, el hígado y el bazo para el estudio histológico. Los resultados muestran la no existencia de diferencia significativa entre los valores experimentales y controles para los aclaramientos de inulina y PAH. El estudio histológico no evidenció alteración alguna en los animales tratados con ozono con respecto a los controles. Se concluye la conveniencia de usar dicho gas como alternativa para arteriografia en pacientes en los cuales no se pueda usar los compuestos iodados.

OZ-P-071: EL EFECTO DEL OZONO SOBRE LA MORFOLOGÍA DE DIFERENTES TEJIDOS DE RATAS.
Lucía González (a), Hilario P. Gómez (a), Ernesto Barber (b), Saray del Río (b), Jorge Banasco (c), Carlos Ugarte (d) y Jorge P. Alfonzo (a).
(a) Instituto de Nefrología "Dr. Abelardo Buch López", (b) Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas "Victoria de Girón", (c) Hospital "Hermanos Ameijeiras", (d) Centro de Investigaciones Médico Quirúrgicas, Cuba.

A principio de los años noventa el ozono se utilizó experimentalmente por investigadores de nuestra Institución como medio de contraste, sustituyendo al yodo en modelos experimentales en perros, obteniéndose resultados similares al método usado tradicionalmente para visualizar la aorta abdominal y sus ramas. Para la introducción del uso del ozono como medio de contraste fue necesario demostrar su inocuidad mediante la administración del gas y el estudio morfológico y funcional de los tejidos. Para este estudio se utilizaron diez ratas macho Wistar de 300 a 350 g y de 4 a 8 meses de edad. Se llegó a la aorta y vasos ilíacos mediante incisión abdominal previa anestesia, se cateterizaron las arterias ilíacas primitivas, 1 cm por encima de las arterias renales y se insufló ozono a una dosis de 1 mL por kg de peso corporal, con una concentración de 33 mg/L, en bolo, lentamente durante 15 min. Se retiró el catéter y después del aclaramiento plasmático y toma de muestras para estudios funcionales se sacrificaron los animales y se tomaron muestras de hígado, bazo y riñón, los que se fijaron en glutaraldehido-paraformaldehido y se procesaron según técnicas convencionales para microscopia óptica y electrónica. En las observaciones por microscopia de luz no se encontraron alteraciones significativas en ninguno de los tres órganos, lo que ratifica, en el caso del riñón, observaciones de estudios anteriores. En microscopia electrónica se encontró ligera fibrosis periportal en un caso y aumento de imágenes de apoptosis en otros en las muestras de hígado, las muestras de bazo y riñón presentaron estructura normal. Los resultados se discuten con relación a los hallazgos macroscópicos encontrados en las autopsias.